介绍细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系

问题： 100g大肠杆菌溶于1L破碎液里（破碎掖：50mM Tris-Cl（PH8.5） 5mM EDTA 0.14M NaCl），搅拌，发现菌液发粘，菌体不能够很好分散，用高压匀质机破碎，加压后，菌液不能进入匀质机，速度很慢，请问是何原因？能有好的办法解决，很好用匀质机快速破碎菌体？
解析：将破碎液的量加大，不能很好分散可能是量太大；超声处理5－10分钟，菌液粘度即可大大降低，也可促进菌体分散。
问题：怎样合理选择超声波破碎参数（条件）？
解析：不同型号的设备功率不一样，功率的大小决定了使用变幅杆的大小范围（直径2mm至几十毫米），你使用多大的变幅杆就在设备的上调至该刻度（很简单的）！变幅杆的大小决定了处理量。一般情况，5ml以下选3mm，5～50ml可选6～8mm，50ml以上选10mm以上的变幅杆！占空比不用关心，主要是指超声时间和停顿时间的比值。
问题：从细胞中提取酶，破碎时间长会影响到酶的活性，怎么办？
解析：如果需要的是胞内酶，细胞破碎程度和需要的酶获得之间基本上有正比关系。破碎时间长的确会影响到酶的活性。这就需要在**佳的破碎时间和酶活性之间做出判断，**直接的办法是先绘制相关曲线（酶活性和时间的关系曲线）。
如果实验中破碎的是棒状杆菌（也是很难破壁的G＋菌），破碎时间控制在30min左右，酶活较好。如果是基质菌丝的话,好可以考虑用溶菌酶处理一下。
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